Hur man gör tryptisk sojaagar (TSA)?
Placera kolven på den heta omrörningsplattan, vrid plattan till hög temperatur och koka upp den.
Tryptic Soy Agar (TSA) är ett komplext medium; den används för att odla snabbriga eller icke snabbriga mikroorganismer.
- Agar: En sulfaterad polysackarid som används som förtjockningsmedel.
- Autoklav: Är en kammare fylld med ånga under tryck. Syftet med autoklavering är att sterilisera vätskor och vissa fasta ämnen. Den använder våt värme främst för att den dödar bakterier snabbare än torr värme.
- Buffert: En lösning med ett extremt stabilt pH.
- Komplext medium: är ett medium fullt av rika aminosyror och vitaminer som hjälper mikrobiell tillväxt, TSB är ett exempel på ett komplext medium.
- Odla / odla: Processen med växande mikroorganismer.
- Snabb: är en organism som kräver en näringsrik miljö för att odla.
- Media / medium: En flytande eller fast gel som används för att odla mikroorganismer
- Tryptikassojabuljong (TSB): TSB är rik på aminosyror, vitaminer och innehåller flera substrat för mikrobiell tillväxt, såsom enzymatisk smältning av kasein, natriumklorid för osmotisk jämvikt, dikaliumfosfat som fungerar som ett buffertmedel för att upprätthålla pH, papaisk smältning av sojamjöl och vatten.
- Agar
- Trypticase soja buljong (TSB)
- 1 L Erlenmeyer-kolv - Kärlet måste vara dubbelt så mycket som den vätska som ska autoklaveras.
- Metalllock för Erlenmeyer-kolven
- Stor magnetisk omrörare
- Varm omrörningsplatta
- 500 ml destillerat vatten
- Rengör plastvägningsbåten
- Toppbelastningsbalans
- Graderad cylinder
- Hot pad eller vanta
- Lång teflon magnetisk spetsstång
- Autoklav
- Autoklavtejp
- Tejp
- Markör
- Timer
Sätt tillbaka metalllocken på kolven och placera kolven tillbaka på den heta rörplattan.
- 1Använd markören och tejpen kolven med ditt namn, datum och lösningens namn (TSA).
- 2Skjut försiktigt in den stora magnetiska omröraren i erlenmeyer-kolven.
- 3Mät 500 ml destillerat vatten med den graderade cylindern.
- 4Häll 500 ml destillerat vatten från den graderade cylindern i erlenmeyer-kolven.
- 5Placera metalllock på kolven.
- 6Placera kolven på den heta omrörningsplattan, vrid plattan till hög temperatur och koka upp den.
- 7Placera den rena plastvägningsbåten på den översta belastningen och tara (noll).
- 8Väg cirka 6 gram agar.
- 9Ta bort kolven från den heta omrörningsplattan med din heta mitt och häll agar i kolven.
- 10Sätt tillbaka metallkåpan på kolven och placera kolven på den heta omrörarplattan.
- 11Slå på omrörningsplattans urval och börja blanda med medelhastighet och öka sedan blandningshastigheten gradvis till medelhög under en minut. Fortsätt vid hög värme och medelhög omrörningshastighet tills all agar är upplöst, cirka 15 minuter.
- 12Placera den rena plastvägningsbåten på den översta belastningen och tara (noll).
- 13Väg upp cirka 15 gram TSB.
- 14Ta bort kolven från den heta omrörningsplattan med din heta vanta och häll TSB i kolven.
- 15Placera metallkåpan tillbaka på kolven och fortsätt att värma lösningen vid hög temperaturinställning och medelhög omrörningshastighet tills den inte längre är grumlig. (Tips: för att avgöra om lösningen är färdig, plocka upp den med din heta vanta och håll kolven mot ljuset. Om du ser några kristaller är lösningen inte klar.)
- 16När TSA-lösningen är klar tar du bort den från den heta omrörningsplattan med din heta mitt och placerar den på en ren yta som inte får mycket luftflöde.
- 17Stäng av den heta rörplattan.
- 18Använd den långa teflonmagnetiska spetsstången för att ta bort omröraren i kolven. Detta kan göras genom att placera stången i kolven och vidröra omröraren.
- 19Täck kolven med metallkåpan.
- 20Klipp av en remsa av autoklavtejp som är ungefär 8 centimeter (7,6 cm) lång och placera tejpen vertikalt på sidan av metallkåpan ner till kolven. Tejpen ska hålla ihop locket och kolven.
- 21Ta din lösning till autoklaven och följ autoklaveringsanvisningarna.
Ta bort kolven från den heta omrörningsplattan med din heta mitt och häll agar i kolven.
- En 500 ml lösning av TSA ger cirka 10-15 plattor.
- Ingrediensförhållandena kan variera beroende på tillverkning av produkten.
- Följ utgångsdatumet på TSB och agarbehållare.
- TSA är gul-bärnstensfärgad.
- TSA är irriterande för ögon, hud och andningsorgan. Använd med försiktighet.
- Lämna inte TSA-buljong på den heta rörplattan utan uppsikt.
- Följ lagringsprotokollet på TSB och agarbehållare.
- Följ korrekt avfallsprotokoll på TSB och agarbehållare.
Läs också: Hur man går på en fantastisk trädjakt?
