Hur utför jag flasköverföring med fruktflugor?
Med flugorna längst ner på injektionsflaskan, ta bort kontakten och vänd injektionsflaskan i tratten på den nya flaskan.
Odling av fruktflugor är en vanlig praxis i forsknings- och inlärningslaboratorier. Fruktflugor är en utmärkt modell för experiment och är lätta att odla och hålla vid liv. Eftersom de reproducerar sig snabbt måste de överföras till nya injektionsflaskor med färsk mat var 10-14 dagar. Processen är relativt enkel så länge du följer varje steg noggrant.
Del 1 av 2: förbereda de nya flaskorna
- 1Sterilisera injektionsflaskorna. Använd injektionsflaskor av plast eller glas som kan steriliseras i en autoklav. En autoklav är en process som använder överhettad ånga och höga tryck för att sterilisera laboratorieutrustning. Tvätta injektionsflaskorna med ett milt rengöringsmedel och vatten, sterilisera sedan i autoklaven i 20 minuter vid 121°C.
- Om du inte har tillgång till en autoklav kan du tvätta injektionsflaskorna i en 10% blekmedel. Skölj väl efter tvätt.
- Det här steget är viktigt för att ta bort alla typer av föroreningar som kan påverka din flugkoloni.
- 2Rehydrera drosophila media i ampullen. Fyll röret cirka 0,2 av vägen med det uttorkade mediet. Tillsätt tillräckligt med vatten så att maten är helt fuktig. Låt det sitta i några minuter och tillsätt mer vatten efter behov för att säkerställa att maten är helt återhydrerad.
- Matytan ska se blöt ut och ha ett glänsande utseende.
- Tillsätt några jästkorn till toppen av mediet innan du sätter flugorna i flaskan.
- 3Odla flugorna vid rumstemperatur. Flugor har en idealisk miljö på 25°C och 60% fuktighet, men det räcker att lämna dem i rumstemperatur och i direkt solljus. Du vill se till att media förblir fuktiga så att flugorna inte blir uttorkade, eftersom det här är deras enda vattenkälla.
- Om media torkar ut måste du ändra det genom att överföra flugorna till en ny injektionsflaska med färsk mat.
Tillsätt några jästkorn till toppen av mediet innan du sätter flugorna i flaskan. - 4Anslut injektionsflaskan när den inte används. För att upprätthålla injektionsflaskans sterilitet före flygöverföring, håll injektionsflaskan stängd genom att försegla den med pluggen. Använd en bomulls- eller skumplugg för att stoppa injektionsflaskan. Använd inte en gummipropp eftersom det kommer att kväva flugorna.
- Sträckta bomullsbollar kan användas om du inte har en skumplugg till hands.
Del 2 av 2: överföring mellan ampuller
- 1Placera en tratt i den nylagade nya injektionsflaskan. Se till att injektionsflaskan kan stå på egen hand eller placera den i ett rack för att hålla den upprätt. Ta bort kontakten och placera en liten tratt i ampullen. Du kommer att använda denna tratt för att överföra flugorna från det gamla röret till det nya.
- Det nya röret måste ha det förberedda mediet innan det överför flugorna.
- 2Knacka försiktigt ner flugorna. Placera flaskan med flugor ovanpå en mjuk yta, t.ex. en gummimusmatta. Knacka försiktigt ned flaskan på ytan så att flugorna faller till botten av flaskan. Fortsätt att knacka på injektionsflaskan tills alla flugorna faller till botten.
- Flugorna kommer bara att bedövas ett ögonblick, så nästa steg måste utföras snabbt.
- Alternativt kan du placera flaskan i frysen i 8-10 minuter och bedöva flugorna. Kylan kommer att få flugorna att sova och de kommer att falla till botten av flaskan. De kommer att stanna kvar i denna dumhet i några minuter, vilket gör det enkelt att överföra.
- 3Ta bort kontakten och vänd injektionsflaskan i tratten. Med flugorna längst ner på injektionsflaskan, ta bort kontakten och vänd injektionsflaskan i tratten på den nya flaskan. Knacka försiktigt på flaskorna för att få flugorna från en injektionsflaska till en annan. Fortsätt att knacka på den nya injektionsflaskan tills flugorna är nere. Anslut den nya flaskan för att innehålla flugorna.
- Se till att alla flugor har överförts innan du sätter i den nya injektionsflaskan.
- De första gångerna du gör den här överföringen är det bra att ha en andra person som hjälper dig med processen.
Knacka försiktigt ned injektionsflaskan på ytan så att flugorna faller till botten av flaskan. - 4Förvara vid rumstemperatur i direkt solljus. Fruktflugor trivs i en miljö på 25°C med cirka 60% luftfuktighet. Om du inte kan replikera dessa förhållanden, lämna dem helt enkelt vid rumstemperatur, men undvik torr miljö. Brist på fukt torkar ut maten och leder till mer frekventa överföringar av injektionsflaskor.
- Flugor bör överföras ungefär var 10-14 dagar så länge maten förblir fuktig.
- Du bör börja om om din injektionsflaska har bakterier, till exempel om det växer en brun fläck i dina media.
- Du kan lägga till ett svampdödande medel i ditt media för att förhindra kontaminering, men se till att följa instruktionerna eftersom för mycket kan påverka tillväxten negativt.
- Flaskor
- Svampliknande pluggar
- Drosophila i en förgjord injektionsflaska
- Jäst
- Dehydratiserad drosophila-mat (Formel 424)
- Vatten
Läs också: Hur glömmer jag ett dåligt testresultat?
Relaterade artiklar
